proktolog kołodziejczyk ad

Próbki testowe były prowadzone równolegle z kontrolą poliklonalną (reaktywnym migdałkiem), kontrolą monoklonalną (linia komórek Raji B) i kontrolą negatywną (bez matrycowego DNA). Ekstrakcje z każdej próbki wykonywano w różnym czasie i wykonywano dwukrotnie, aby zminimalizować ryzyko zanieczyszczenia krzyżowego. Produkty analizowano na 10% żelach poliakrylamidowych, barwiono bromkiem etydyny i oglądano pod promieniowaniem ultrafioletowym. Klonowanie i sekwencjonowanie
Produkty PCR pochodzące z resekcji żołądka, następnej endoskopowej biopsji żołądka i biopsji warg poddawano elektroforezie w 10% żelu poliakryloamidowym i w każdym przypadku próbkę z większego z dwóch pasm ponownie amplifikowano w celu wzmocnienia sekwencji. Produktami poddano 4-procentowy żel agarozowy o niskiej temperaturze topnienia i odpowiedni fragment wycięto z żelu, oczyszczono zestawem Mermaid (Bio 101, La Jolla, CA) i poddano ligacji z fagemidem Bluescript-SKII ( Stratagene, La Jolla, CA) przed transfekcją do bakterii SURE (Stratagene). Kolonie przeszukiwano za pomocą PCR, jak opisano powyżej, i sześć rekombinantów z każdego miejsca, które dało fragment o odpowiedniej wielkości, wybrano do sekwencjonowania metodą Sangera, z zestawem Seąuenase (United States Biochemical, Cleveland). Komputerowe analizy otrzymanych sekwencji DNA przeprowadzono na serwerze Narodowego Centrum Informacji Biotechnologicznej w National Library of Medicine6 i oprogramowania do analizy sekwencji (wydanie 5) z Genetics Computer Group7. Regiony D i J określono na podstawie opublikowanych sekwencji8,9.
Wyniki
Ryc. 1. Ryc. 1. Przekrój owrzodzenia z pierwotnej próbki do gastrektomii, ukazujący gęsty naciek limfocytarny. W panelu B (x100), widok o wyższej mocy nacieku limfoidalnego pokazany w panelu A (x10), reaktywny pęcherzyk (strzałki) jest otoczony komórkami podobnymi do centrocytu, które mają zajęte gruczoły (grot strzałki). (Hematoxylin and eosin.).
Figura 2. Figura 2. Próbka z biopsją żołądka wykazująca infiltrację przez komórki przypominające centrocytem, które atakowały gruczoły, tworzące zmianę limfoepitelialną (hematoksylina i eozyna, x400). Rycina 3. Rycina 3. Próbka z biopsji lipy pokazująca przewlekły stan zapalny ograniczony do niewielkiego gruczołu ślinowego (panel A, x60) i szczegół infiltrującego stan zapalny z limfocytami i komórkami plazmatycznymi otaczającymi Acini (panel B, x400) (hematoksylina i eozyna) . Skrawki z pierwotnej próbki do resekcji żołądka wykazywały wrzód leżący nad ciężkim naciekiem limfocytarnym. Zarówno ta próbka, jak i kolejna próbka z biopsji żołądka ujawniły histologiczne cechy chłoniaka z komórek B o niskim stopniu złośliwości typu MALT (ryc. i ryc. 2). Reaktywne pęcherzyki z komórek B były otoczone przez rozlany naciek komórek podobnych do centrocytów, które atakowały gruczoły żołądka, tworząc zmiany limfocytowe; były one najbardziej widoczne w próbce z biopsją żołądka. Próbka z biopsji warg (Figura 3) zawierała kilka odrębnych mniejszych gruczołów ślinowych, w każdym z nich był przewlekły naciek zapalny złożony z małych limfocytów i rozproszonych większych komórek i komórek plazmatycznych. Wystąpił pewien naciek nabłonka przewodu, ale pojawienie się w żaden sposób nie sugerowało chłoniaka
[podobne: badanie krwi kwas moczowy cena, apteka legnica dyżur, psychoterapeuta ursynów ]

Dodaj komentarz